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App-Nr.: VBS0087
Version 1 05/2025
Analyse von Dextran mit einem AZURA® SEC-System
J. Wesolowski1, J.L. Dauwe2, C. Dauwe2, J. Kramer1, K. Folmert1, G. Greco1;
wesolowski@knauer.net
1 KNAUER Wissenschaftliche Geräte GmbH, Hegauer Weg 38, 14163 Berlin

2 AppliChrom GmbH®, Germendorfer Allee 20, 16515 Oranienburg bei Berlin,
https://www.applichrom.de

Zusammenfassung
In diesem Anwendungsbericht wurde eine Dextranprobe mit dem KNAUER AZURA® SEC-System gemessen. Die AppliChrom® SuperOH-P 300 und 350 Säulen sind gut für diese Anwendung geeignet, da sie ein großes Porenvolumen mit hohen Plattenzahlen kombinieren, was zu einer hervorragenden Auflösung führt. In diesem Fall wurden diese beiden unterschiedlichen SuperOH-P Säulen in Serie geschaltet, um einen Molekulargewichtsbereich von 1 000 bis 1 000 000 Da abzudecken. Die entwickelte Methode wurde zur Bestimmung von Dextran verwendet.
Einführung
Dextran ist ein Biopolymer, das aus zahlreichen Glucose-Molekülen besteht, die durch glykosidische Bindungen miteinander verknüpft sind. Diese komplexen Kohlenhydrate werden von Bakterien, insbesondere von Milchsäurebakterien wie Leuconostoc mesenteroides, synthetisiert, wenn sie einem Medium mit Saccharose als Kohlenstoffquelle ausgesetzt sind [1]. Solche Bakterien sind häufig in pflanzlichen Quellen sowie in fermentierten Lebensmitteln zu finden [1]. Die Größe und Struktur von Dextran hängen von dem verwendeten Bakterienstamm und den spezifischen Fermentations- oder Synthesebedingungen ab [1]. Daher wird Dextran in der Industrie unter kontrollierten Bedingungen und optimierten Parametern produziert, um eine effiziente Herstellung zu gewährleisten [2]. In einigen Fällen werden chemische Modifikationen vorgenommen, um spezifische Molekulargewichte oder Eigenschaften zu erreichen [1]. Diese Anpassungen erhöhen die Attraktivität von Dextran für verschiedene Anwendungen in der Lebensmittel- und Pharmaindustrie sowie für die Forschung. Zum Beispiel wird Dextran als Trägersubstanz in der Pharmazie und als Verdickungs- und Feuchtigkeitsspender in der Kosmetikindustrie verwendet [1, 3]. Die Eigenschaften von Dextran werden erheblich von seiner molekularen Größe beeinflusst, was den Bedarf an effektiven analytischen Methoden zur Charakterisierung erhöht [1]. Eine vielversprechende Methode ist die Größenausschlusschromatografie (SEC), die eine größenabhängige Trennung ermöglicht und wertvolle Informationen über Molekulargewicht und Molekulargewichtsverteilung liefert [4, 5].
Ergebnisse
Abb. 1 zeigt das Chromatogramm der Probenmessung, die mit dem KNAUER AZURA® SEC-System unter Verwendung der AppliChrom® SuperOH-P-300 und SuperOH-P-350 Säulen-Kombination durchgeführt wurde. Die Probe und die dargestellten Daten für dieses Anwendungsnotiz wurden von AppliChrom® bereitgestellt. In einer Probe mit einer unbekannten Matrix konnte das Dextran zuverlässig bei einer Retentionszeit von 10,47 Minuten identifiziert werden. Diese Ergebnisse bestätigen die Anwendbarkeit der verwendeten chromatografischen Methode zur Analyse von Dextran.

Abb. 1 Chromatogramm der Probe, die mit SuperOH-P-300 - SuperOH-P-350, RID, d extran bei 10,47 min eluierte, gemessen wurde.
Fazit
Das KNAUER AZURA® SEC-System, in Verbindung mit den AppliChrom® SuperOH-P-Säulen, ist ein perfektes Werkzeug für Messungen in der SEC. Die Kombination dieses fortschrittlichen SEC-Systems und spezialisierter Säulen löst erfolgreich die Dextranprobe.
Material und Methoden
Tab. 1 Methodenparameter.
Durchflussrate | 1 ml/min |
Isokratisk | H2O / PBS-Buffer pH 7.1 |
Kolonnentemperatur | 25 °C |
Injektionsvolumen | max. 50 µl |
Erkennung | RID |
Datenrate | 10 Hz |
Zeitkonstante | 0.1 s |
Zeit | 30 min |
Tab 2 SEC-Systemkonfiguration
Instrument | Beschreibung | Artikel-Nr. |
Pumpe | AZURA® P 6.1L LPG-Pumpe mit 10 ml Pumpenkopf, Edelstahl | |
Autosampler | AZURA® AS 6.1L, analytischer HPLC-Autosampler, 862 bar | |
Detektor 2 | AZURA® RID 2.1L, analytischer Brechungsindexdetektor | |
Thermostat | AZURA® CT 2.1 | |
Eluentenbehälter | AZURA® E 2.1L | |
Spalte | AppliChrom® SuperOH-P-300, 7 µm, | |
Spalte | AppliChrom® SuperOH-P-350, 10 µm, | |
Kapillaren | Start-Up-Kit mit flexiblen, vorkonfektionierten Kapillaren für analytische HPLC-Systeme mit 1/16"-Anschlüssen | |
Software | ClarityChrom® 9.1.0 - Workstation, Steuerung des Autostichprobennehmers enthalten | |
Software | ClarityChrom® 9.1.0 - SEC/GPC Erweiterung |

Abb. 2 SEC-Systemaufbau
Referenzen
[1] Díaz-Montes, E. (2021). Dextran: Quellen, Strukturen und Eigenschaften. Polysaccharide, 2(3), 554–565.
[2] Aman, A., Siddiqui, N. N. & Qader, S. A. U. (2011). Charakterisierung und potenzielle Anwendungen von hochmolekularem Dextran, das von Leuconostoc mesenteroides AA1 produziert wird. Kohlenhydrat-Polymere, 87(1), 910–915.
[3] Kim, C. J., Hamielec, A. E. & Benedek, A. (1982). Charakterisierung von Dextranen durch Größenausschlusschromatographie unter Verwendung des DRI/LALLSP-Detektorsystems. Journal of Liquid Chromatography, 5(3), 425–441.
[4] Huang, G. & Huang, H. (2018). Anwendung von Dextran als nanoskalige Arzneimittelträger. Nanomedizin, 13(24), 3149–3158.
[5] De Belder, A. N. (1993). DEXTRAN. In Elsevier eBooks (S. 399–425).
Anwendungsdetails
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Methode |
GPC/SEC |
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Modus |
GPC/SEC |
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Substanzen |
Dextran |
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CAS-Nummer |
9004-54-0 |
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Version |
App-Nr.: VBS0087 | Version 1 |